葉綠素儀有關(guān)葉綠素a的測定過程概述

　　有關(guān)葉綠素a的測定過程可能要用到分光光度計、天平、研缽、棕色容量瓶、小漏斗、定量濾紙、吸水紙、擦境紙、滴管等儀器。準(zhǔn)備幾片新鮮的植物葉片，準(zhǔn)備96%的乙醇、石英砂和碳酸鈣粉，具體操作步驟如下：

　　取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料，擦凈組織表面污物，去除中脈剪碎。稱取剪碎的新鮮樣品2g，放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及3mL95％乙醇，研成均漿，再加乙醇10mL，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3-5min。取濾紙1張置于漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗，濾液流至100mL棕色容量瓶中；用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數(shù)次，后連同殘渣一起倒入漏斗中。用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。后用乙醇定容至100mL，搖勻。取葉綠體色素提取液在波長665nm、645nm和652nm下測定吸光度，以95％乙醇為空白對照。

　　然后根據(jù)資料上提供的葉綠素a的計算方法，就可算出新鮮的植物葉片葉綠素a的含量。具體公式如下：

　　葉綠素a=（12.7A665-2.69A645）·(V/1000W)；

　　葉綠素b=（12.7A645-2.69A665）·(V/1000W)；

　　總?cè)~綠素a=（20.0A645+8.02A665）·(V/1000W)或總?cè)~綠素a=（A652/34.5）·(V/1000W)。